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ELISA試劑盒冰凍保留的血清標(biāo)本須如何來(lái)防范
發(fā)布時(shí)間： 2017-06-13 點(diǎn)擊次數(shù)： 1690次ELISA試劑盒標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果，然后導(dǎo)致假陰性成果。凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意，不要進(jìn)行劇烈振動(dòng)，重復(fù)倒置混勻即可。標(biāo)本在保留中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所形成的的混濁或絮狀物時(shí)，應(yīng)離心沉積后取上清檢查。一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作符號(hào)的測(cè)定方法發(fā)生非特異性干擾。
ELISA試劑盒血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作別離，則能夠在2～8℃下保留一周，如為有菌操作，則主張冰凍保留。要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有相似過(guò)氧化物的活性。在以HRP為符號(hào)酶的ELISA測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡(jiǎn)單在溫育過(guò)程中吸附于固相，然后與后邊加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所排泄的一些酶也許會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果。樣本的長(zhǎng)期保留，應(yīng)在-70℃以下。