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細(xì)胞因子ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)條件
發(fā)布時(shí)間： 2019-05-17 點(diǎn)擊次數(shù)： 1818次細(xì)胞因子ELISA試劑盒液體類標(biāo)本： 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
血漿： 應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
尿液： 用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
細(xì)胞培養(yǎng)上清： 檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。
ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)條件如下：
1、固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維 素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。
2、包被抗體或抗原的選擇：將抗體或抗原吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一 般要求PH在9.0～9.6之間。
3、 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。然后再固定其 它條件或采取“方陣法"，在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
4、酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體有潛在的致癌作用，細(xì)胞因子ELISA試劑盒應(yīng)注意防護(hù)。
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