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研域解析：如何讓ELISA實(shí)驗(yàn)體系更穩(wěn)定?
發(fā)布時(shí)間： 2019-12-05 點(diǎn)擊次數(shù)： 1879次ELISA檢測(cè)體系能夠說(shuō)是現(xiàn)在運(yùn)用多的檢測(cè)方法，并且技術(shù)手段很多，對(duì)于花板，假陽(yáng)性，全顯色，全部顯色，顯色比空缺還低，這些都起到了至關(guān)重要的效果，一定要多留心，那么elisa檢測(cè)體系穩(wěn)定，這些實(shí)驗(yàn)進(jìn)程都要留心。
應(yīng)留心以下原理：由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體外表的疏水基團(tuán)間的效果，這種物理吸附長(zhǎng)短特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體外表。小分子必需依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。
還有有的包被原或許不是蛋白，對(duì)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事前對(duì)其改造再加以包被，親和素生物素:先親和素先包被載體，參加生物素化的DNA，這種包被方法平均、結(jié)實(shí)，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。
包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不能夠被其識(shí)別，所以保留抗原很重要。feng鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地閑暇，然后排擠ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。但有時(shí)由于試驗(yàn)的需要，包被原的特殊性也或許選用中性的緩沖溶液來(lái)包。