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上海研域生物ATCC細胞培養(yǎng)中常見方法步驟
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細胞培養(yǎng)方法:
1. 細菌污染
細菌污染是實驗室細胞培養(yǎng)中常見的污染，即使在細胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因為操作不慎而引起污染。常見的有革蘭氏陽性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌，其中又以白色葡萄球菌較常見。
培養(yǎng)細胞受細菌污染后，會出現培養(yǎng)液變混濁，pH改變。污染后細胞發(fā)生病理改變，胞內顆粒增多、增粗，圓脫落死亡。
2.真菌污染
真菌污染是細胞培養(yǎng)過程中常見的一種，常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。
培養(yǎng)細胞受真菌污染后，可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點，有的散在生長，培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁；倒置顯微鏡下可見絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養(yǎng)基中，有的呈鏈狀排列。
真菌污染后，細胞生長變慢，但后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡。
3. 支原體污染
支原體是介于細菌與病毒之間能獨立生活的微生物，小直徑0.2μm，一般過濾除菌無法去除它，光鏡下難以看清它的形態(tài)結構。開始不易發(fā)現，能在偏堿條件下生存，對有抗藥性。多吸附于細胞表面或散在于細胞之間。
培養(yǎng)細胞受支原體污染后，部分敏感細胞可見細胞生長增殖變慢，部分細胞變圓，從瓶壁脫落。但多數細胞污染后無明顯變化，或略有變化，若不及時處理，還會產生交叉污染。
4. 病毒污染
組織細胞培養(yǎng)過程中，如果沒有除去潛在的病毒，就會產生病毒污染。目前，從原代猴腎細胞的培養(yǎng)中已發(fā)現不少于20種血清性病毒。
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