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上海研域生物大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟
發(fā)布時(shí)間： 2025-10-21 點(diǎn)擊次數(shù)： 349次上海研域生物誠(chéng)信供應(yīng)試劑盒產(chǎn)品多年，大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒一直以優(yōu)質(zhì)的試劑盒質(zhì)量與真誠(chéng)的服務(wù)取勝，我們相信，品質(zhì)與服務(wù)是永遠(yuǎn)的主題，同時(shí)國(guó)家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予了極大的重視。
大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 a50μl，再加入顯色劑 b50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（od 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
計(jì)算和結(jié)果判定：
試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00 陰性對(duì)照平均值≤0.10
臨界值（cut off）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值 0.15
陰性判定：樣品 od 值< 臨界值（cut off）者為金黃色葡萄球菌腸毒素(se)陰性 陽(yáng)性判定：樣品 od 值≥ 臨界值（cut off）者為金黃色葡萄球菌腸毒素(se)陽(yáng)性。
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