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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫方案
發(fā)布時(shí)間： 2010-09-21 點(diǎn)擊次數(shù)： 2534次實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫方案
1、抗原: 蛋白質(zhì)、多肽、細(xì)胞器、細(xì)胞、組織等。
2、免疫方式：皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等。
3、不同動(dòng)物免疫所需抗原量（以蛋白免疫為例）
>18-20kDa <18-20kDa
動(dòng)物 抗原量 *抗原量 抗原量 *抗原量
兔子 20-200 100 50-400 200
小鼠 2-40 15 4-60 40
大鼠 10-50 30 20-150 50
綿羊 100-1000 200 200-1000 400
母雞 20-200 100 50-400 200
單位：微克
4、免疫方案（以免疫兔子為例）：
天數(shù) 0 14 28 38 56 66 87
注射 x x x x
采血 2ml 2ml 2+20ml 2+50-70ml
5、注意：
1）*次免疫用*佐劑與免疫原混合，以后加強(qiáng)免疫用不*佐劑與免疫原混合，采取多點(diǎn)，時(shí)間間隔式免疫法。
2） 如果用細(xì)胞免疫兔子，那么每次免疫所需細(xì)胞量為2-3 x 107 cells。
3） 在連續(xù)免疫完三次后，需要少量取血進(jìn)行ELISA檢測，檢測所免疫動(dòng)物的抗體滴度，一般滴度能達(dá)到1:10,000-50,000。在處死所免疫的動(dòng)物前一周應(yīng)加強(qiáng)一次免疫。
4） 如果用小鼠免疫，可以尾靜脈小量采血（大約50µl），zui后取眼球大量采血（大約500-1000µl）；如果用兔子免疫，可以耳緣靜脈小量取血（大約2mL），zui后心臟大量取血（50-100mL）
5） 按血清制備的標(biāo)準(zhǔn)方法將血清分離，并且分裝成小份，儲(chǔ)藏在-80oC。