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臨床ELISA測(cè)定中可能會(huì)出現(xiàn)的問題
發(fā)布時(shí)間： 2016/2/17 點(diǎn)擊次數(shù)： 913次提 供 商： 研域（上海）化學(xué)試劑有限公司 資料大?。?/td> 圖片類型： 下載次數(shù)： 71 次 資料類型： DOC 瀏覽次數(shù)： 913 次 相關(guān)產(chǎn)品： 詳細(xì)介紹： 文件下載 盡管ELISA測(cè)定的操作步驟非常簡單，但有可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的因素卻較多，分布在測(cè)定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測(cè)定中出現(xiàn)問題的可能原因，特對(duì)常見問題及原因歸納總結(jié)于下表。
臨床ELISA測(cè)定中可能會(huì)出現(xiàn)的問題及可能的原因問題
可能的原因（非試劑盒本身的原因）1．弱陽性質(zhì)控樣本檢測(cè)不出 溫育的時(shí)間或溫度不夠；顯色反應(yīng)時(shí)間太短；所用配制緩沖液的蒸餾水有問題
2．測(cè)定的重復(fù)性差 （相同樣本兩次測(cè)定結(jié)果不一致） 這是典型的由測(cè)定操作引起的問題，包括
（1）加樣本及試劑量不準(zhǔn)；孔間不一致；
（2）加樣過快，孔間發(fā)生污染；（3）加錯(cuò)樣本；
（4）加樣本及試劑時(shí)，加在孔壁上部非包被區(qū)；
（5）不同批號(hào)試劑盒中組分混用；
（6）溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致；
（7）孔內(nèi)污染雜物；
（8）酶標(biāo)儀濾光片不正確；（9）血清標(biāo)本未*凝固即加入，反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞，易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。
3．白板
（陽性對(duì)照不顯色）
（1）漏加酶結(jié)合物；（2）洗板液配制中出現(xiàn)問題，如量筒不干凈，含酶抑制物（如疊氮鈉）等。
（3）漏加顯色劑A或B；
（4）終止劑當(dāng)顯色劑使用。4．全部板孔均有顯色
（1）洗板不干凈；
（2）顯色液變質(zhì)；（3）加底物的吸光受酶污染；
（4）洗板液受酶等污染。
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