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合適ELISA試劑盒檢測樣本的辦法
發(fā)布時間： 2017-11-16 點(diǎn)擊次數(shù)： 1449次血清是zui常用的ELISA試劑盒標(biāo)本之一，ELISA檢測中血漿一般可視為與血清平等的標(biāo)本，標(biāo)本中煩擾性物質(zhì)是引起檢測后作用偏高或偏低的主要原因，煩擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類；
外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測定的血標(biāo)本的搜集、貯存等不當(dāng)所構(gòu)成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集 不全和采血管中添加物等影響。
由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞損壞溶解時釋放出許多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號的 ELISA測定中，會導(dǎo)致非特異性顯色，煩擾測定作用。
標(biāo)本受細(xì)菌污染 ：因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可發(fā)生非特異性顯色而煩擾測定作用。
ELISA試劑盒標(biāo)本保存不當(dāng) ：在冰箱中保存過久的標(biāo)本，血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體，在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、甚至構(gòu)成檢測OD值偏高；
標(biāo)本凝集不全；在ELISA檢測中影響血清血漿樣本的要素許多，在考慮試劑要素和操作要素之外，也應(yīng)從標(biāo)本要素方面進(jìn)行分析。
常見的煩擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
類風(fēng)濕因子 ：血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）在ELISA檢測中，可與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合，然后導(dǎo)致檢測OD值偏高。
補(bǔ)體 ： ELISA系統(tǒng)中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發(fā)生變構(gòu)，其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點(diǎn)被露出出來，使C1q 可以將二者連接起來，然后構(gòu)成檢測OD值偏高。
嗜異性抗體；人類血清中含有能與嚙齒類動物（如鼠等）Ig (s) 結(jié)合的天然嗜異性抗體，可將ELISA系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來，也能構(gòu)成檢測OD值偏高。
ELISA試劑盒此外血清中嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等，均對ELISA測定作用有煩擾作用。